細胞培養(yǎng)基：根據所培養(yǎng)細胞類型，選擇合適的培養(yǎng)基，并添加相應的血清、抗生素、生長因子等成分 。培養(yǎng)基需提前過濾除菌，確保無菌狀態(tài) 。

細胞：復蘇凍存細胞或從培養(yǎng)瓶中消化獲取對數生長期細胞，制成細胞懸液 。通過細胞計數確定合適的接種密度。

其他耗材：準備無菌移液器吸頭、移液管、離心管、鑷子等耗材，所有耗材需保證無菌 。若需對培養(yǎng)皿進行額外包被（如使用 ECM 蛋白包被未處理表面的培養(yǎng)皿），準備相應包被試劑 。

熒光顯微鏡成像：若進行熒光染色實驗，當細胞生長至合適階段，按照免疫熒光染色流程進行操作 。包括固定細胞（如使用 4% 多聚甲醛固定 15-20 分鐘）、通透處理（0.1% Triton X-100 處理 10 分鐘）、封閉（5% BSA 封閉 30 分鐘）、一抗和二抗孵育等步驟 。染色完成后，用 PBS 清洗干凈，直接在熒光顯微鏡下觀察 。由于 ibidi µ-Dish 35 mm 高壁培養(yǎng)皿底部的低自發(fā)熒光特性，可獲得清晰的熒光圖像 。

其他顯微鏡成像：如需進行 TIRF、DIC 等特殊顯微鏡成像，根據相應顯微鏡的要求，將培養(yǎng)皿放置在配套的載物臺上 。對于需使用特殊蓋子（如 DIC 蓋子）的實驗，在成像前更換為相應蓋子 。調整顯微鏡參數，獲取高質量的細胞圖像 。