在豬胚胎干細(xì)胞建系研究中，科研人員面臨著諸多挑戰(zhàn)，如細(xì)胞解離時(shí)易受損，影響干細(xì)胞的多能性維持及后續(xù)傳代。TrypLE Express 酶憑借其溫和的細(xì)胞作用特性，發(fā)揮了關(guān)鍵作用。中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)韓建永教授團(tuán)隊(duì)在建立豬胚胎干細(xì)胞系過(guò)程中，使用 TrypLE Express 酶對(duì)早期胚胎進(jìn)行單細(xì)胞分離。該酶特異性裂解賴(lài)氨酸和精氨酸 C - 末端肽鍵的特性，使其能精準(zhǔn)地將胚胎細(xì)胞解離，且減少對(duì)細(xì)胞的損傷。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，經(jīng) TrypLE Express 酶處理獲得的單細(xì)胞，成功建立了傳代 260 次以上的豬胚胎干細(xì)胞系 ，這是目前世界家畜干細(xì)胞傳代次數(shù)最多的記錄。該細(xì)胞系可進(jìn)行連續(xù)多次基因編輯操作，為后續(xù)開(kāi)展家畜胚胎干細(xì)胞領(lǐng)域研究，如基因功能驗(yàn)證、干細(xì)胞育種等奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

造血干細(xì)胞在治療白血病等血液疾病方面具有重要價(jià)值，其體外擴(kuò)增與定向分化研究一直是熱點(diǎn)。美國(guó)費(fèi)城兒童醫(yī)院和賓夕法尼亞大學(xué)醫(yī)學(xué)院的研究團(tuán)隊(duì)，在對(duì)小鼠造血干細(xì)胞的研究中應(yīng)用了 TrypLE Express 酶。在體外培養(yǎng)造血干細(xì)胞以實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增時(shí)，使用該酶進(jìn)行細(xì)胞傳代操作。與傳統(tǒng)胰蛋白酶相比，TrypLE Express 酶能更好地維持造血干細(xì)胞表面標(biāo)志物的完整性，如 CD117 等。這些標(biāo)志物對(duì)于造血干細(xì)胞的自我更新及定向分化調(diào)控至關(guān)重要。研究團(tuán)隊(duì)利用 CD117/LNP 系統(tǒng)進(jìn)行 mRNA 遞送實(shí)驗(yàn)時(shí)，需先對(duì)造血干細(xì)胞進(jìn)行解離與培養(yǎng)，在此過(guò)程中 TrypLE Express 酶確保了細(xì)胞狀態(tài)的穩(wěn)定，使得后續(xù)實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蝽樌M(jìn)行。實(shí)驗(yàn)成功實(shí)現(xiàn)了將 mRNA 通過(guò) LNP 載體遞送到小鼠造血干細(xì)胞，并從概念上證明了通過(guò) LNP 遞送可以做到對(duì)造血干細(xì)胞的體外基因編輯，為開(kāi)發(fā)新型清髓策略及治療基因突變導(dǎo)致的血液病提供了新思路 。

北京大學(xué)鄧宏魁研究團(tuán)隊(duì)在運(yùn)用化學(xué)小分子實(shí)現(xiàn)細(xì)胞命運(yùn)重編程，將人成體細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槎酀撃芨杉?xì)胞的研究中，TrypLE Express 酶在細(xì)胞操作環(huán)節(jié)發(fā)揮了輔助作用。在將皮膚細(xì)胞等成體細(xì)胞進(jìn)行解離、培養(yǎng)并誘導(dǎo)為 iPSC 的過(guò)程中，細(xì)胞需經(jīng)歷多次傳代與處理。TrypLE Express 酶操作簡(jiǎn)便的優(yōu)勢(shì)得以凸顯，它可直接替代傳統(tǒng)胰蛋白酶用于細(xì)胞解離，且僅通過(guò)稀釋就能滅活，無(wú)需添加血清或抑制劑終止反應(yīng)，避免了血清成分對(duì)細(xì)胞誘導(dǎo)過(guò)程的干擾。該團(tuán)隊(duì)通過(guò)化學(xué)小分子誘導(dǎo)獲得的 iPSC，進(jìn)一步培養(yǎng)出人體胰島細(xì)胞，并在非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物上實(shí)驗(yàn)成功，未來(lái)有望用于治療糖尿病。在這一系列復(fù)雜的細(xì)胞誘導(dǎo)與分化研究中，TrypLE Express 酶保障了細(xì)胞解離環(huán)節(jié)的高效與穩(wěn)定，為多能干細(xì)胞的制備及后續(xù)應(yīng)用研究提供了有力支持 。

中國(guó)科學(xué)院腦科學(xué)與智能技術(shù)創(chuàng)新中心陳躍軍高級(jí)研究員科研團(tuán)隊(duì)，在干細(xì)胞治療帕金森病的研究中，涉及人多能干細(xì)胞定向分化為中腦多巴胺能神經(jīng)細(xì)胞的過(guò)程。在細(xì)胞培養(yǎng)與處理過(guò)程中，TrypLE Express 酶用于細(xì)胞解離。由于帕金森病細(xì)胞替代療法對(duì)供體細(xì)胞藥物的質(zhì)量要求，需確保目的細(xì)胞比例高且細(xì)胞狀態(tài)良好。TrypLE Express 酶溫和保護(hù)細(xì)胞的特性，使得在解離細(xì)胞時(shí)，能保持細(xì)胞的活性與分化潛能，有助于后續(xù)獲得高純度的中腦多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞。研究團(tuán)隊(duì)利用創(chuàng)建的新技術(shù)，發(fā)現(xiàn)并鑒定了特異性標(biāo)記分子，開(kāi)發(fā)了目的細(xì)胞高度富集的供體細(xì)胞藥物制備新策略，為實(shí)現(xiàn)更安全有效的帕金森病細(xì)胞替代療法邁出重要一步，而 TrypLE Express 酶在整個(gè)細(xì)胞藥物制備流程中的穩(wěn)定表現(xiàn)，為該研究的推進(jìn)提供了基礎(chǔ)保障 。