一抗結構差異與結合特性：不同種屬的一抗，如鼠源、兔源、羊源等，其免疫球蛋白的結構和氨基酸序列存在差異。這些差異會導致一抗與抗原表位的結合方式、親和力有所不同。例如，鼠源單克隆抗體可能對某些抗原表位具有較高的特異性和親和力，而兔源多克隆抗體則可能識別多個抗原表位。膜再生液若不能很好地保留膜上抗原表位的完整性，就可能使某些種屬的一抗無法有效結合抗原，造成假陰性結果 。

再生液成分的潛在影響：膜再生液中的復性劑、抗氧化劑和 pH 調節劑等成分，可能與不同種屬一抗發生相互作用。高濃度的復性劑（如尿素）可能會改變一抗的空間結構，影響其與抗原的結合能力；某些抗氧化劑（如 DTT）可能會干擾一抗中半胱氨酸殘基形成的二硫鍵，導致一抗活性降低。此外，再生液的 pH 值若與一抗的最適結合 pH 不匹配，也會影響一抗的結合效率。例如，當膜再生液的 pH 過高或過低時，可能使一抗發生變性，無法特異性識別抗原 。

實驗結果的準確性需求：在多指標檢測或比較不同樣本的實驗中，若使用的一抗來自不同種屬，膜再生液對這些一抗的兼容性就顯得尤為重要。如果膜再生液僅適配部分種屬的一抗，而對其他種屬一抗的結合產生抑制或干擾，會導致實驗結果缺乏可比性，無法真實反映樣本中蛋白質的表達情況。為確保實驗結果的準確性和可靠性，選擇膜再生液時必須充分考慮其對不同種屬一抗的兼容性，必要時可通過預實驗，測試不同種屬一抗在使用特定膜再生液處理后的結合效果，從而篩選出兼容性最佳的膜再生液 。